Terapia con Stem Cells

Ciertos órganos producen células madre multipotentes como la Médula Ósea, lo que da lugar a una liberación de las mismas para curar cualquier órgano dañado o disfuncional, en este caso el Páncreas.

Aquí se utiliza un método alternativo que consiste en la administración de células de islotes autólogos, en el cual se las aísla para posteriormente implantarlas al mismo órgano con el fin de reparar los daños y restablecer las funciones del mismo.

Hay varias razones por las cuales se realiza este tipo de trasplante y entre las principales están:

1) No presenta rechazo

2) No son necesarios medicamentos inmunosupresores 

3) El periodo de conservación en frió es corta

4) Los islotes se trasplantan inmediatamente sin cultivo previo

Bibliografía

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1.	S M. PubMed. [Online].; 2011 [cited 2017 Junio 18. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21785738.
2.	Regeneration Center on Thailand. Regeneration Center on Thailand. [Online].; 2014 [cited 2017 Junio 18. Available from: https://stemcellthailand.org/therapies/acute-pancreatitis-islet-cell-replacement/.

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Modelos animales para Investigación de Pancreatitis Crónica

Ratas WBN/Kob

Este tipo de ratas han sido importantes para el estudio del desarrollo de la enfermedad por que muestran tanto los cambios morfológicos como los bioquímicos característicos; las mismas son procedentes de una colonia de ratas Wistar - Universidad de Basilea. 

Los estudios que se llevaron a cabo en parte fueron para estudiar la evolución de la enfermedad y los factores que influyen, por lo que la misma fue inducida mediante diversos métodos, a más de identificar su correlación con el desarrollo de fibrosis.

Los primeros cambios fueron notorios a los 3 meses de edad con el inicio de fibrosis periductular que conduce a una perdida del parénquima; la función endócrina y exócrina se vio alterada porque hubo una disminución en la excreción de NBT-PABA en orina a mas de glucosuria.

La enfermedad es inducida en las ratas macho cuando alcanzan la madurez sexual y se aumenta la síntesis de andrógenos; en los hallazgos se encontró que en ratas hembra al realizar ovariectomia se desarrollo fibrosis pancreática; entonces de acuerdo a las manifestaciones encontradas se hizo una correlación y se identificó que las hormonas sexuales están involucradas en el desarrollo de Pancreatitis Crónica. 

Bibliografía

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1.	Alexander A Aghdassi JMSCFUWMSaMML. Biomed Central. [Online].; 2011 [cited 2017 Junio 11. Available from: https://fibrogenesis.biomedcentral.com/articles/10.1186/1755-1536-4-26.

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ADN Recombinante en la Naturaleza - ADN Recombinante de Pancreatitis

ADN RECOMBINANTE EN LA NATURALEZA

La recombinación genética es un proceso biológico que se produce normalmente en todos los organismos, tras el cual se produce un cambio del genoma (patrimonio genético del que está dotado un organismo) y se verifica normalmente con la rotura y la reunión del ADN.

un ejemplo de este se presenta en la Escherichia Coli en la cual se han encontrado enzimas llamadas recombinasas las cuales catalizan reacciones de recombinación natural; específicamente en esta bacteria se encargan de la reparacion de las roturas en el ADN de doble hebra.

cabe destacar que en levaduras y algunos eucariotas se encuentras dos recombinasas:

- RAD51 --> Recombinación Mitótica y Meiótica

- DMC1 --> Recombinación meiótica

ADN RECOMBINANTE - PANCREATITIS

- Tripsina Recombinante

"La tripsina es una serín proteasa que lleva a cabo la catálisis de reacciones de hidrólisis de enlaces peptídicos que contienen residuos de aminoácidos básicos, tales como lisina y arginina, reduciendo el tamaño de proteínas grandes y haciéndolas accesibles a posterior degradación por otras proteasas."

Esta proteasa normalmente es obtenida del páncreas porcino, pero la misma suele estar contaminanda y puede ser infecciosa, por lo que para su producción es utilizada la tecnología de ADN recombinante que utiliza a la levadura P. Pastoris que actúa como hospedero; esta levadura es metilotrófica puesto que tiene la capacidad de crecer en metanol como única fuente de carbono y energía por lo cual en su metabolismo involucra AOX (enzima alcohol oxidasa). Para la producción de esta proteína recombinante se introduce un vector que porta el gen heterólogo bajo el control del promotor del gen AOX1, y por recombinación homóloga se integra a su genoma, siendo posible inducir la expresión de dicho gen heterólogo al emplear metanol como única fuente de carbono.

Cabe recalcar que en esta enfermedad hay una mutación que interfiere con la correcta produccion de tripsina, por lo cual esta es una alternativa para dicha deficiencia.

Bibliografía

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1.	IVU. IVU. [Online].; 2015 [cited 2017 Junio 04. Available from: https://ivu.org/spanish/trans/ssnv-genetic.html.
2.	Garibay JAF. UANL. [Online].; 2011 [cited 2017 Junio 04. Available from: http://eprints.uanl.mx/2404/1/1080049623.pdf.

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Exoma Screening - WES

Prueba caracterizada por la secuenciación de exones que se lleva a cabo, para lo cual se requiere una muestra de sangre en la cual se aplica la prueba.

El ADN se enriquece mediante el kit de exon humano SureSelect de Agilent (CA) para el sistema de secuenciación SOLid. El enfoque va dirigido a los exones de 18.000 genes conocidos lo cual cubre 38 Mb del genoma humano; cada muestra se secuencia en 1/4 del cuadrante SOLid 4 y se obtiene 3.1 de 2.2 Gb de secuencia mapeable, las lecturas fueron dadas por los espacio de colores que se formaban los cuales se asignaron al genoma humano de referencia (NCBI GRCh37.2) y a variantes (ambos SNPs e indeles) que fueron llamados utilizando el software CLCbio Genomics Workbench.

Estudio realizado a un grupo de personas con cierto grado de consaguinidad que presentaban mutaciones en los genes implicados, donde se determino una delección de una base en el exón 1 de SPINK1 (c.27delC) 

Bibliografía

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1.	Jessica LaRusch PMMB. PubMed. [Online].; 2012 [cited 2017 Mayo 28. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3651649/pdf/nihms-469306.pdf.

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Prueba de PCR

PCR - REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA

Es una prueba utilizada para identificar delecciones y/o duplicaciones en regiones del ADN. ademas se incluye una prueba de NGS (Secuenciación de Próxima Generación) de PRSS1, SPINK1, CTRC y CFTR.

El gADN se aisla de una muestra del paciente mediante un kit estandarizado y cuantificado y consiste en la secuencia de enriquecimiento de los exones de codificación específica y nucleótidos intrónicos adyacentes que se lleva a cabo por una metodología cebo de captura usando sondas de oligonucleótidos largo biotinilados.

Este procedimiento es seguido por PCR que puede ser --> PRC cuantitativo o PCR  de largo alcance que luego se complementa con NGS; adicional se realiza la Secuenciacion de Sanger que se lleva a cabo para la detección una variante heterocigota fiable.

Bibliografía

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1.	Sheila Solomon MCDCW,MPyJL,P. PubMed. [Online].; 2012 [cited 2017 Mayo 21. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK84399/.
2.	AmbryGenetics. AmbryGenetics. [Online].; 2017 [cited 2017 Mayo 21. Available from: http://www.ambrygen.com/tests/pancreatitis-testing.

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Prueba de Tamizaje y Confirmatoria

Prueba de Tamizaje

- Prueba de Secretina-Colecistoquinina o Secretina-Ceruleína (PSC)

Prueba invasiva que consiste en la estimulación del páncreas mediante la adminstración intravenosa de secretina, colecistoquinina o ceruleína; para lo cual luego se obtendrán muestras del liquido duodenal. La presencia de bicarbonato es el mejor criterio que permite diferenciar entre pacientes con o sin enfermedad pancreática puesto que se toma en cuenta la disminución en la concentración del mismo o la producción de enzimas.

Prueba Confirmatoria

- Prueba del Sudor

Representa una forma indirecta de evaluar la función de CFTR que estima la concentración de Cloro en el sudor en donde se considera:

Patológica (Cl > 60 mmol/l) 

Borderline (Cl 40-60 mmol/l) 

Normal (Cl < 40 mmol/l)

 

Bibliografía

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1.	Carballo F, Sanz-de-Villalobos E. Research Gate. [Online].; 2014 [cited 2017 Mayo 14. Available from: https://www.researchgate.net/profile/Eduardo_Sanz-de-Villalobos/publication/242125131_PRUEBAS_DE_FUNCION_PANCREATICA_EXOCRINA/links/0deec52c72d3973373000000/PRUEBAS-DE-FUNCION-PANCREATICA-EXOCRINA.pdf.
2.	ECV R. Elsevier. [Online].; 2012 [cited 2017 Abril 30. Available from: http://www.elsevier.es/es-revista-gastroenterologia-hepatologia-14-articulo-pancreatitis-cronica-mas-alla-del-S0210570512001082.

Alteraciones de la Epigenética

Uno de los factores que intervienen es el estrés oxidativo, al cual las células acinares se adaptan puesto que las mismas tienen cierto grado de sensibilidad por las mutaciones involucradas; dicha adaptación puede implicar el estado de diferenciación y la reprogramación epigenética de las mismas. Cabe destacar que el alcohol puede ser un factor que contribuye al estrés oxidativo por el agotamiento de “carroñeros” como el selenio, vitaminas E y C a más de la riboflavina; dicho agotamiento va a estar involucrado en la inducción y/o propagación del daño, a más de la acumulación de lípidos que dañan la célula acinosa como resultado de la acción de sus metabolitos tóxicos.

Curiosamente, la reprogramación epigenética del genoma de la célula acinar puede preceder, y en realidad acentuar la lesión asociada a la pancreatitis. Según estudios realizados esta incide en la activación de genes que promueven, en lugar de impedir la lesión.

Bibliografía

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1.	Fernandez-Barrena MG. Sceince Direct. [Online].; 2016 [cited 2017 Mayo 07. Available from: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/B9780128023891000204.
2.	Klaus E. Mönkemüller PM. Sceince Direct. [Online].; 2017 [cited 2017 Mayo 07. Available from: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/B9780323340625000571.

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Alteraciones de la Traducción

Bien, como he indicado anteriormente hay varios genes mutados implicados en esta enfermedad, tal es el caso del gen CFTR, las mutaciones en este gen implican una síntesis defectuosa, puesto que el mecanismo de traducción, existe la presencia de un codón de parada prematuro, que en algunos casos producen alteraciones de splicing mientras que en otros se producen cambios en el marco de lectura; por lo cual el ARNm es inestable y por ende tiene como consecuencia la síntesis de una proteína anormal que tiende a ser inestable y de fácil degradación. 

Funcionalmente, esta mutación incide en la perdida de conductancia del canal de Cl- en el epitelio afectado, lo cual incide en la secreción de bicarbonato para mantener al tripsinógeno (codificado por PRSS1) en un estado adecuado.

Estructura normal de CFTR

Cabe destacar que este gen presenta otras mutaciones que inciden en su función:

Bibliografía

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1.	Raya ECV. Elsevier. [Online].; 2012 [cited 2017 Abril 30. Available from: http://www.elsevier.es/es-revista-gastroenterologia-hepatologia-14-articulo-pancreatitis-cronica-mas-alla-del-S0210570512001082.
2.	Sheppard DN WMl. Structure and function of CFTR chloride channel. Physiol Rev. ; 79(46).

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Alteraciones de la Transcripción

Si bien se ha indicado, hay varias mutaciones relacionadas a esta enfermedad; la mutación de R122H del gen PRSS1 es de las más comunes puesto que segun estudios existe un cambio del nucleótido Guanina (G) por Adenosina (A) de la secuencia de uno de los alelos del gen del tripsinógeno catiónico en el exon 3 

PRSS1: cG>A

Hay una sustitución del aminoácido arginina por histidina en la posición 122: R122H.

La repercusión de las variantes identificadas va a incidir en la síntesis del producto que se necesita, por lo cual va a tener consecuencias sobre la actividad de la tripsina, ya que en la transcripción de esta cadena al no existir la secuencia de bases requerida la información que el ARNm llevara sera errónea y dará lugar a la síntesis de una molécula denominada "Supertripcina" en la cual se ha eliminado el sitio de autolisis de la tripsina y por ende la misma no puede ser desactivada.

Bibliografía

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1.	Raya ECV. Science Direct. [Online].; 2012 [cited 2017 Abril 23. Available from: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0210570512001082.
2.	Carbonella P, Glovera G, Fernández JA, Ramírez M, Marín C, Castellanos G, et al. Elsevier. [Online]. [cited 2017 Abril 23. Available from: www.elsevier.es/es-revista-cirugia-espanola-36-pdf-13086880-S300.

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Alteraciones Genómicas

La Pancreatitis se presenta como una enfermedad hereditaria autosómica dominante con una mutación en el gen serina proteasa 1(PRSS1) que codifica tipsinógeno catiónico.  La mutación R122H interfiere con la autolisis de la trispsina; la mutación N29I da como resultado la alteración de la molécula de tripsina sintetizada que reduce su afinidad para el inhibidor de serina proteasa. El regulador de conductancia transmembrana de fibrosis quística (CFTR) es importante puesto que codifica una proteína de canal de cloruro esencial para secreción de líquidos, proteínas y bicarbonato el cual ayuda a mantener al tripsinogeno en un estado adecuado; si este presenta una mutación habra una hidratación inadeacuada y por ende una acumulación de enzimas digestivas ocacionando una autodigestión. Las mutaciones en este gen se han reconocido en personas con Pancreatitis Crónica Idiopática.

Bibliografía

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1.	Banerje S, Yachimski P. Science Direct. [Online].; 2014 [cited 2017 Abril 16. Available from: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/B9780123864567049030.

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Pancreatitis - Definición

La Pancreatitis es la inflamación del tejido pancreático, la cual puede ser clasificada en aguda y crónica, siendo la ultima la mas grave puesto que se caracteriza por cambios morfológicos irreversibles en la glándula los cuales inciden en la alteración de las funciones exocrinas y endocrinas; de acuerdo a la definición actual se la reconoce como un síndrome fibroinflamatorio patológico del páncreas en sujetos con factores de riesgo, ya sean genéticos, ambientales, metabólicos, obstructivos entre otros, los cuales desarrollan respuestas patológicas persistentes a un daño parenquimatoso.

Bibliografía

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1.	JE DM. Sceince Direct. [Online].; 2016 [cited 2017 Abril 9. Available from: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0210570516301790.

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Bienvenida y Dedicatoria

Hola! Bienvenido/a a mi blog, espero que el contenido de este sea de gran ayuda y te sirva tanto en lo académico como para la vida, ya que opino que la persona que se quiere educar por si sola busca ser cada día mejor que el anterior, puesto que busca saber un poco más en el gran mar del conocimiento.

Realizo este blog con el mejor afán del mundo, ya que se lo dedico a mi padre que ha sido un gran maestro de vida para mi y que por poco se va de mi lado por una enfermedad llamada Pancreatitis de la cual me gustaría hablarles. Pues bien, esta enfermedad consiste en la inflamación de la glándula pancreática que se desencadena cuando las enzimas digestivas comienzan a digerirla, se clasifica en aguda y crónica según se presente, siendo la segunda la más grave puesto que se presenta con precedentes, como es el consumo excesivo de alcohol, enfermedades auto inmunes o por herencia entre sus causas. Cabe destacar que si la enfermedad no es atendida adecuadamente, fácilmente podría llevar al paciente a un cuadro más grave pudiendo incluso causar la muerte.